水傳病原微生物PCR-納米金顯色快速檢測方法
更新時間：2014-07-31 14:15
來源：環境科學學報
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摘要：水傳病原微生物是腹瀉等腸胃疾病發病的主要原因，而發展快速、有效的檢測方法對于控制和減少該類微生物的傳播風險十分重要.因此，本文研究了PCR反應結合不修飾的納米金顆粒（Gold nano-particles， AuNPs）顯色檢測方法的最佳鹽濃度、探針含量、PCR反應條件等，并從納米金制備、病原菌種類、檢測特異性等方面進行考核，確定了最優檢測條件為：10 μL PCR擴增產物混合20 pmol探針，95 ℃反應5 min，55.5 ℃反應3 min后，40 ℃雜交10 min；此時，先后加入90 μL實驗用納米金和一定濃度的PBS溶液，室溫觀察顏色變化.結果發現，納米金溶液由紅色變為紫色或近于無色為陽性結果，對應的吸光度值遷移出530 nm，以此可達到快速檢測病原微生物的目的.
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