一種高效提取焦化廢水活性污泥總DNA的方法
更新時間：2010-04-15 15:47
來源：環境科學學報
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摘要：對焦化廢水活性污泥中微生物建立高質量的總DNA提取方法是開展分子生態學研究的重要前提.通過反復凍融-蛋白酶K-SDS、溶菌酶-反復凍融-SDS及溶菌酶-反復凍融-蛋白酶K-SDS這3種綜合方法對焦化廢水活性污泥總DNA進行提取，以OD260/OD280、OD260/OD230、產率、片段完整性、片段大小5個指標來評價樣品總DNA的提取效果.結果表明，溶菌酶-反復凍融-蛋白酶K-SDS法所提取的總DNA的OD260/OD280值約為 1.8，產率為1.90～16.30 μg·g-1，片斷完整性好，主帶清晰，大小約為23 kb，其PCR反應抑制物少，能夠直接進行16S rRNA基因的PCR擴增.溶菌酶-反復凍融-蛋白酶K-SDS法能夠為焦化廢水活性污泥中微生物的分子生態學研究提供高質量的總DNA.
關鍵詞：焦化廢水 活性污泥 DNA提取 PCR擴增
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