關于微生物鏡檢的原理！
原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關系；原生動物個體大，便于觀察；對于環(huán)境變化比細菌敏感，更早更容易反映環(huán)境的變化。微生物鏡檢中對原生動物的種類組成、數(shù)量、生長和變化狀況的觀察，也能反映出細菌的生長和變化情況，即間接地評價污水處理過程和處理效果的好壞，起指導生產(chǎn)的作用。
一、鏡檢微生物的分類
1、形態(tài)
原生動物門屬真核原生生物界，是單細胞的微型動物，由原生質(zhì)和一個或多個細胞核組成。原生動物和多細胞動物相同，具有新陳代謝、運動、繁殖、對外界刺激的感應性和對環(huán)境的適應性等生理功能。原生動物個體很小，長度一般在100～300μm之間。它們都具有細胞膜。多數(shù)種屬的細胞膜結(jié)實而富有彈性，從而使原生動物本體保持一定的體形。但也有一些種屬，例如變形蟲，只有一層極薄的原生質(zhì)膜，不能保持固定的體形。原生動物一般具有一個或兩個以上的細胞核，其形狀多種多樣，它們在其細胞內(nèi)產(chǎn)生形態(tài)的分化，形成了能夠執(zhí)行各項生命活動和生理功能的胞器。在運動胞器方面有鞭毛、偽足和纖毛；在營養(yǎng)胞器方面有胞口、胞咽和食物泡；用以排出廢料和調(diào)節(jié)滲透壓的胞器有伸縮泡等。有些種類的原生動物的細胞膜內(nèi)分布著肌絲，具有收縮變形的功能。
2、營養(yǎng)方式
原生動物的營養(yǎng)方式分為以下幾類：①動物性營養(yǎng)，以吞食細菌、真菌、藻類或有機顆粒為生，絕大多數(shù)原生動物為動物性營養(yǎng)，有些具有胞口、胞咽等攝食器；②植物性營養(yǎng)，在有陽光的條件下，一些含色素的原生動物可利用二氧化碳和水進行光合作用合成碳水化合物，如植物性鞭毛蟲，但種類和數(shù)量都很少；③腐生性營養(yǎng)，以死的機體或無生命的可溶性有機物質(zhì)為生；④寄生性營養(yǎng)，以其它生物的機體(即寄主)作為生存的場所，并獲得營養(yǎng)和能量。
3、分類
1981年國際原生動物學會公布了原生動物分類系統(tǒng)，其中在水處理中常見的有三類：
①肉足類，其細胞質(zhì)可伸縮變動而形成偽足，作為運動和攝食的胞器，運動速度達3μm/s，典型的肉足類為變形蟲屬、簡便蟲屬、表殼蟲屬和鱗殼蟲屬等；
②鞭毛類，具有一根或一根以上的鞭毛。鞭毛長度與其體長大致相等或更長些，是運動器官，鞭毛蟲又可分為植物性鞭毛蟲和動物性鞭毛蟲，常見的植物性鞭毛蟲有滴蟲屬、屋滴蟲屬和眼蟲屬等，常見的動物性鞭毛蟲有波豆蟲屬、尾波蟲屬等，鞭毛蟲的運行速度達15～300μm/s；
③纖毛類，原生動物周身表面或部分表面具有纖毛，作為行動或攝食的工具，具有胞口、口圍、口前庭和胞咽等司吞食和消化的細胞器官，分為游泳型和固著型兩種，游泳型包括漫游蟲屬、草履蟲屬、腎形蟲屬、斜管蟲屬等，固著型常見的有鐘蟲屬、累枝蟲屬、蓋蟲屬、聚縮蟲屬、盾纖蟲屬和殼吸管蟲屬等，纖毛類運動速度較快，可達200～1000μm/s。
二、鏡檢微生物與細菌的關系
1、活性污泥的基本特征
活性污泥是污水活性污泥處理系統(tǒng)的反應工作主體，是由細菌、微型動物為主的微生物與懸浮物質(zhì)、膠體物質(zhì)混雜在一起所形成的絮狀體顆粒。良好的活性污泥具有很強的吸附分解有機物的能力和良好的沉降性能，絮體的大小約為0.02～0.2mm，多為茶褐色，微具土壤味，密度約為1.005g/cm3，含水率99%左右。活性污泥中生存著各種微生物，構成了復雜的微生物相。在多數(shù)情況下，活性污泥中的主要微生物是細菌，伴之以營腐生的原生動物構成基本營養(yǎng)層次，然后是以細菌為食的掠食性原生動物占優(yōu)勢。同時可以查看中國污水處理工程網(wǎng)更多技術文檔。
2、原生動物與細菌的功能關系
在廢水生物處理系統(tǒng)中將污染物質(zhì)降解的主要是細菌。原生動物與細菌的關系主要為：
①掠食關系，原生動物在食物鏈中處于捕食細菌的作用。一方面，原生動物通過對細菌的捕食，能促進細菌的生長，使細菌的生長能維持在對數(shù)生長期，防止種群的衰老，提高細菌的活力，而且原生動物活動產(chǎn)生溶解性有機物質(zhì)(DOM)可被細菌再利用，促進了細菌的生長；另一方面，原生動物中存在的某些類型(如纖毛類)具有吞食游離細菌的巨大能力，而游離的細菌個體小、密度小，較難沉淀，易被出水帶出而影響水質(zhì)。有人證明奇觀獨縮蟲在自然水體中1h能吃3萬個細菌。Curds等人在曝氣池中接種纖毛類原生動物，出水大為改善。
②絮凝作用，細菌生長到一定程度后就凝集成絮狀物。這種絮狀物為原生動物提供了著生的環(huán)境，反過來絮狀物上的原生動物能加速絮凝過程。Curds等證明纖毛蟲能分泌兩種物質(zhì)，一種稱為P物質(zhì)，是一種多糖類碳水化合物；另一種是屬于單糖結(jié)構的葡萄糖及阿拉伯糖，表面電荷為負的懸浮顆粒會吸收這種P物質(zhì)，通過懸浮顆粒表面電荷的改變，就使懸浮顆粒集結(jié)起來，形成絮狀物。另外，纖毛蟲還能分泌一種粘液，能把絮狀物再聯(lián)結(jié)起來。原生動物分泌的粘液對懸浮顆粒和細菌均有吸附能力。這就促進了菌膠團的形成和處理能力的提高。
三、鏡檢的目的
要了解污水處理過程的變化或處理水的好壞，最好直接研究分析細菌的生長情況。但是對于細菌的觀察、分類鑒定的時間很長，不能及時起指導生產(chǎn)的指示和預報作用。原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關系；原生動物個體大，便于觀察；對于環(huán)境變化比細菌敏感，更早更容易反映環(huán)境的變化。直接觀察原生動物的種類組成、數(shù)量、生長和變化狀況，也能反映出細菌的生長和變化情況，即間接地評價污水處理過程和處理效果的好壞，起指導生產(chǎn)的作用。
四、鏡檢分析方法
1、形態(tài)和生理觀察
采用顯微鏡對污水處理過程中的活性污泥生長、變化進行觀察。特別是觀察原生動物的形態(tài)和生理特征。顯微鏡的放大倍數(shù)采用16×10或16×40即可，觀察到的原生動物應與標準圖進行對照。建議可以采用《淡水微型生物圖譜》上的圖片進行比較。通過原生動物的形態(tài)來確認其種類和特性，進而來分析其所處的生理狀態(tài)或生理階段，這能間接反映活性污泥的特性。
2、數(shù)量分析
建議采用以下簡單易行的方法：用1mL移液管，移取1mL清水到表面皿中。用一橡膠頭小吸管，從表面皿中將1mL水全部吸盡，然后以均勻的速度徐徐滴下，記錄1mL水的滴數(shù)，并重復數(shù)次，以免誤差。用橡膠頭小吸管在反應器中取得均勻的混合液，滴一滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，用低倍顯微鏡由左到右或由上到下(注意應采用相同的方向順序)進行原生動物的計數(shù)。應把蓋玻片下所有原生動物記錄，并重復數(shù)次。用一滴混合液中原生動物的記錄數(shù)乘以計數(shù)吸管1mL水的滴數(shù)，即為每mL活性污泥混合液的原生動物數(shù)。
五、微生物的指示作用
1、指示活性污泥性質(zhì)
1）污泥惡化
活性污泥絮凝體較小，往往在0.1～0.2mm以下。主要出現(xiàn)以下優(yōu)勢原生動物：豆形蟲屬、腎形蟲屬、草履蟲屬、瞬目蟲屬、波豆蟲屬、尾滴蟲屬、滴蟲屬等。這些都屬于快速游泳型的種屬。污泥嚴重惡化時，微型動物幾乎不出現(xiàn)，細菌大量分散，活性污泥的凝聚、沉降能力下降，處理能力差。
2）污泥解體
絮凝體細小，有些似針狀分散。主要的優(yōu)勢原生動物有：變形蟲屬、簡便蟲屬等肉足類。
3）污泥膨脹
活性污泥沉降性能差，SVI值高。由于絲狀菌的大量生長，出現(xiàn)能攝食絲狀菌的裸口目旋毛科、全毛類原生動物及擬輪毛蟲等。
4）污泥從惡化恢復到正常
通過反應參數(shù)和環(huán)境的改變，活性污泥從惡化狀態(tài)恢復到正常的過渡期常常有下列原生動物出現(xiàn)：漫游蟲屬、斜葉蟲屬、管葉蟲屬等，這些都屬于慢速游泳或匍匐行進的生物。
5）污泥良好
易成絮體，活性高，沉降性能好。出現(xiàn)的優(yōu)勢原生動物為：鐘蟲屬、累枝蟲屬、蓋蟲屬、有肋盾纖蟲屬、獨縮蟲屬、各種吸管蟲類、輪蟲類、寡毛類等這些均屬于固著性種屬或者匍匐性種屬。
2、指示反應操作環(huán)境
1）優(yōu)勢種屬
Modoni在1988年對污水處理廠進行這方面的研究，總結(jié)出：高負荷、曝氣量相對不足時，小鞭毛蟲占優(yōu)勢；過短的水力停留時間，造成小的游泳型纖毛蟲占優(yōu)勢；非常高的負荷或存在難降解的物質(zhì)時，出現(xiàn)小的裸變形蟲和鞭毛蟲；大量出現(xiàn)匍匐性和固著性纖毛蟲或有殼變形蟲時，表明運行環(huán)境良好，處理效果好。另外有研究證明，溶解氧不足易出現(xiàn)阿托氏菌屬、扭頭蟲屬和新態(tài)蟲屬等；而過分曝氣則出現(xiàn)肉足類及輪蟲類；有機負荷很低，出現(xiàn)硝化作用時，能觀察到游仆蟲屬、旋口蟲屬、表殼蟲屬、鱗殼蟲屬及輪蟲等；在除氮污水廠，低負荷，長水力停留時間及高溶解氧的場合，有殼變形蟲是最好的指示生物。
2）形態(tài)變化
在一定條件下，原生動物能分泌膠質(zhì)并形成膜將蟲體包圍起來，形成孢囊。大多數(shù)孢囊用以保護蟲體免受不利的環(huán)境因素(如溫度不適，pH值變化，食料短缺等)的影響。待環(huán)境轉(zhuǎn)好時，蟲體能恢復活力，脫孢而出。同樣，鞭毛蟲的鞭毛在條件不利時，鞭毛消失，條件適宜時，又重新生出。當曝氣池中溶解氧降低到1mg/L以下時，鐘蟲生活不正常，體內(nèi)伸縮泡會脹得很大，頂端突進一個氣泡，蟲體很快會死亡；當pH值突然發(fā)生變化超過正常范圍，鐘蟲表現(xiàn)為不活躍，纖毛環(huán)停止擺動，蟲體收縮成團。所以雖然觀察到鐘蟲數(shù)量較大，但蟲體萎靡或變形時，則反映出細菌的活力在衰退，污水處理效果有變差的趨勢。
3）生殖方式
原生動物的生殖方式有無性生殖和有性生殖。無性生殖即簡單的細胞分裂，細胞核和原生質(zhì)一分為二。在營養(yǎng)、溫度、氧等環(huán)境條件良好的場合，原生動物就進行連續(xù)的無性生殖。當出現(xiàn)有性生殖(接合生殖)時，往往預示環(huán)境條件變差或種群已處于衰老期。
3、估計有機負荷
有機負荷的變化會導致原生動物的結(jié)構和數(shù)量變化，尤其是纖毛蟲屬。通過觀察微生物的組成和數(shù)量，就能預測污水廠運行的有機負荷。
4、預測出水水質(zhì)
通過對活性污泥曝氣池中的原生動物的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)雖然原生動物對環(huán)境適應的范圍較寬，但最合適、數(shù)量最多的是集中在一個狹小的范圍。根據(jù)這一特征，將出水BOD分為4個等級：0～10mg/L，11～20mg/L，21～30mg/L，>30mg/L。在生產(chǎn)運行過程時，只要觀察原生動物的構成情況，即可以預測出水BOD了。實踐證明，有柄纖毛蟲的數(shù)量和質(zhì)量是預測出水水質(zhì)最重要的原生動物。
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